Hoe voorkomen ik veel voorkomende misverstanden bij het gebruik van pipet-tips met lage bindende pipet?

Lage bindende pipet -tips Kan monsterresten aanzienlijk verminderen vanwege hun hydrofobe binnenoppervlakontwerp, en zijn met name geschikt voor het hanteren van dure reagentia, viskeuze vloeistoffen of sporenmonsters (zoals eiwitten en nucleïnezuren). Als ze echter niet correct worden bediend, kunnen ze nog steeds de nauwkeurigheid en herhaalbaarheid van het experiment beïnvloeden. Het volgende is een analyse van veel voorkomende fouten en oplossingen die worden gebruikt in combinatie met laboratoriumbedrijfsspecificaties:

Misverstand 1: het negeren van de pre-rinsing van de tip

Verkeerde bewerking: aspireer het monster rechtstreeks en laat de pre-rinsingstap weg.

Invloed: hoewel low-bindende pipet-tips residuen kunnen verminderen, voor monsters zoals serum, eiwitten of organische oplosmiddelen, kunnen hun binnenwanden nog steeds een micro-vloeistoffilm vormen vanwege oppervlaktespanning, wat resulteert in een laag initiële pipettvolume.

Correcte benadering: Herhaal vóór formele pipetting de aspiratieontlading 2 tot 3 keer met hetzelfde monster om een ​​stabiele vloeibare filmlaag op de binnenwand van de punt te vormen (behalve voor vloeistoffen op hoge temperatuur/lage temperatuur).

Misverstand 2: De aspiratiesnelheid is te snel of de hoek is gekanteld

Verkeerde bewerking: aspireer de vloeistof snel of de pipet wordt meer dan 20 ° gekanteld.
Impact:

Pipet te snel: bubbels of terugzuiging (vloeistof snelt de pipet in en vervuilt de zuiger);
Pipet gekanteld: verandert de vloeistofoppervlakdruk, wat resulteert in onnauwkeurig pipettvolume en verhoogd restvolume. Correcte aanpak:
Pipet langzaam en laat langzaam los: werk met een constante snelheid en regelt de zuigerafgiftesnelheid;
Houd verticaal: bewaar de kantelhoek ≤20 ° wanneer de pipetpunt wordt ondergedompeld in het vloeibare oppervlak.
Misverstand 3: negeren van de operationele verschillen van viskeuze vloeistoffen
Verkeerde bewerking: gebruik dezelfde pipettingssnelheid als gewone vloeistoffen voor monsters met hoge viscositeit (zoals glycerol en celophangingen).
Impact: viskeuze vloeistoffen stromen langzaam op de binnenwand van de pipetpunt en snelle ontlading zal een significante toename van het restvolume veroorzaken, waardoor de voordelen van het lage adsorptieontwerp worden gecompenseerd.
Correcte aanpak:

Verleng de onderdompelingstijd: blijf in het vloeibare oppervlak gedurende 1 seconde na het aspireren voordat u het verwijdert, en pauzeer gedurende 1 seconde voordat u de tweede versnelling drukt om de vloeistof te blazen bij het ontladen;
Kies een pipet-tip met brede mond: gebruik voor macromoleculen of celmonsters een pipetpipetpipetpipet met brede mond (70% groter dan de standaard diafragma) om de afschuifkracht te verminderen.
Misvatting 4: Hard slaan bij het installeren van de tip
Verkeerde bewerking: Herhaaldelijk de pipethandgreep raken om de tip te "aan te spannen".
Effect: langetermijneffecten zullen de pipetafdichtingscomponenten dragen, de luchtdichtheid vernietigen en lekkage of volumefout veroorzaken.
Correcte methode: plaats de pipet verticaal in de punt, druk lichtjes en draai links en rechts enigszins om te passen.

Misvatting 5: Onjuist opslag of hergebruik
Verkeerde bewerking:

Leg de pipet plat wanneer er resterende vloeistof in de punt is;
Wegwerptips met lage adsorptie hergebruiken om kosten te besparen. Invloed:
Vlak maken veroorzaakt de terugstroom van vloeistof om de zuigerveer te corroderen;
Hergebruik kan de nauwkeurigheid beïnvloeden als gevolg van kruisbesmetting of structurele vervorming. Correcte methode:
Gooi de punt onmiddellijk na de pipetting weg en hang de pipet verticaal op;
Hergebruik is ten strengste verboden, vooral als het gaat om gevoelige experimenten zoals PCR en isotopen.
Professioneel advies: maximaliseer de voordelen van tips met lage retentierechten
Overeenkomen met de eigenschappen van vloeistoffen:
Vluchtige vloeistoffen (zoals chloroform): vermijd het gebruik van gewone tips met lage retentietips en gebruik oplosmiddelveilige tips of externe zuigerpipetten die zijn ontworpen voor vluchtige reagentia.
Kalibratie Verificatie:
Weeg regelmatig het gewicht van zuiver waterpipetted met een analytische balans (1 ml = 0,9982 g bij 20 ℃) ​​om te controleren of het werkelijke volume aan de standaard voldoet.
Samenvatting van de belangrijkste punten: tips met lage retentierechten verbeteren de nauwkeurigheid door het verlies van het monster te verminderen, maar als de details van de bewerking worden genegeerd, kan deze nog steeds contraproductief zijn. Gestandaardiseerde installatie, snelheidsregeling, aanpassing aan steekproefkenmerken en strikt eenmalig gebruik vormen de basis voor het bereiken van experimenten met hoge herhaalbaarheid.